چکیده

اعتبار سنجی فرآیند فیلتراسیون ضدعفونی کننده گامی حیاتی در حصول اطمینان از اینکه محصولات دارویی الزامات عقیمی را در طول تولید برآورده می کنند است. این فرآیند اعتبارسنجی برای تضمین کیفیت محصول و ایمنی بیمار ضروری است. این مقاله به بررسی اهداف، روش‌های آزمون و معیارهای پذیرش مطالعات اعتبارسنجی کلیدی می‌پردازدتست سازگاری شیمیایی, آزمایش احتباس باکتریایی، وتست مواد قابل استخراج و قابل شستشو (E&L)..

فیلتراسیون ضدعفونی کننده یک فرآیند جداسازی فیزیکی است که میکروارگانیسم ها را از طریق احتباس غشایی از مایعات یا گازها حذف می کند. در شرایط فرآیند مشخص شده، فیلتر باید قابلیت نگهداری داشته باشد107 CFU/cm²ازBrevundimonas diminutaدر هر سانتی متر مربع از منطقه فیلتراسیون موثر برای اطمینان از عقیمی محصول.

رادستورالعمل GMP 2023 برای آماده سازی استریل (جلد I)وگزارش فنی PDA شماره. 26 (TR26): فیلتراسیون مایعاتارائه راهنمایی جامع برای تأیید اعتبار فیلتراسیون استریل کردن. فعالیت‌های اعتبارسنجی شامل انتخاب فیلتر، آزمایش حفظ باکتری، آزمایش یکپارچگی و ارزیابی سازگاری بین فیلتر و سیال فرآیند است. این راهنما همچنین بر روش‌های استریل‌سازی فیلتر، آزمایش یکپارچگی پس از{2}}استفاده و ملاحظات مربوط به استفاده مجدد از فیلتر تأکید می‌کند.

با پیروی از توصیه‌های GMP و PDA TR26، تولیدکنندگان دارو می‌توانند به طور مؤثر فرآیندهای فیلتراسیون استریل‌سازی را اجرا و تأیید کنند. با این حال، اعتبار سنجی فیلتراسیون استریل کردن یک فعالیت پیچیده است که شامل ملاحظات فنی متعدد است و در طول بازرسی های GMP به یک تمرکز مهم تبدیل شده است. این مقاله مطالعات اعتبار سنجی اصلی، استراتژی های اعتبار سنجی مناسب و نقاط کنترل بحرانی را در سراسر فرآیند اعتبار سنجی مورد بحث قرار می دهد.

 

1. آزمایش سازگاری شیمیایی

آزمایش سازگاری شیمیایی ارزیابی می کند که آیا یک کارتریج فیلتر استریل کننده تحت شرایط عملیاتی مشخص، تحت واکنش های شیمیایی نامطلوب یا برهمکنش با سیال فرآیند قرار می گیرد یا خیر.

1.1 روش های آزمایش برای سازگاری شیمیایی

سازگاری شیمیایی به طور کلی با استفاده از یکی از دو رویکرد ارزیابی می شود:

تست خیساندن استاتیک

تست فیلتراسیون چرخش دینامیکی

درتست خیساندن استاتیک، فیلتر یا غشاء در بدترین-شرایط عملیاتی در سیال فرآیند غوطه ور می شود. مشخصات فیزیکی فیلتر یا غشاء قبل و بعد از قرار گرفتن در معرض اندازه گیری می شود.

درتست گردش مجدد دینامیک، فیلتر به یک ظرف و سیستم لوله کشی حاوی سیال فرآیند متصل می شود. یک پمپ پریستالتیک به طور مداوم سیال را از طریق حلقه فیلتراسیون به گردش در می آورد تا شرایط واقعی تولید را شبیه سازی کند. پس از آزمایش، خواص فیزیکی فیلتر قبل و بعد از فیلتراسیون مقایسه می شود.

1.2 پارامترهای تست

مطالعات سازگاری شیمیایی باید ارزیابی شودکل مجموعه فیلتر.

اثرات شرایط فرآیند بر روی فیلتر را می توان با نظارت بر تغییرات در موارد زیر ارزیابی کرد:

یکپارچگی کلی فیلتر (از جمله غشاء، محفظه، O-حلقه ها و غیره)

قابل استخراج

استحکام کششی

نرخ جریان

فشار دیفرانسیل

کیفیت فیلتر

ظاهر فیلتر

مشاهدات میکروسکوپ الکترونی روبشی (SEM).

فشار ترکیدگی

ارزیابی‌های معمول معمولاً شامل آزمایش یکپارچگی قبل و بعد از خیساندن یا فیلتراسیون، همراه با اندازه‌گیری ابعاد فیزیکی فیلتر است، از جمله:

طول

قطر

وزن

علاوه بر این، ویژگی های غشایی که نیاز به ارزیابی دارند عبارتند از:

ظاهر سطحی

ضخامت

ساختار غشایی

اندازه منافذ

استحکام کششی

در میان این پارامترها، ساختار غشاء و اندازه منافذ معمولاً با استفاده از میکروسکوپ الکترونی روبشی (SEM) مشخص می‌شوند.

1.3 معیارهای پذیرش

در طول مطالعه، فیلتر و غشاء باید تمام تست های یکپارچگی را با موفقیت پشت سر بگذارند.

بازرسی بصری باید تأیید کند:

بدون تغییر شکل

بدون ریزش ذرات

بدون تغییر رنگ

برای سایر پارامترهای فیزیکی مانند قطر، وزن و ضخامت، یک انحراف نسبی از± 2٪ تا ± 5٪به طور کلی قابل قبول در نظر گرفته می شود.

 

2. تست حفظ باکتری

اگرچه فیلترهای غشایی درجه استریل کننده-که در تولید دارو استفاده می‌شوند معمولاً دارای اندازه منافذ اسمی هستند.0.22 μmاندازه منافذ به تنهایی توانایی حفظ میکروارگانیسم فیلتر را به اندازه کافی نشان نمی دهد.

2.1 روش تست

آزمایش حفظ باکتری به طور کلی مطابق با انجام می شودASTM F838-20، روش تست استاندارد منتشر شده توسطASTM Internationalبرای ارزیابی عملکرد نگهداری باکتری در فیلترهای غشایی درجه استریل کردن-.

2.2 تست کنترل مثبت

برای جلوگیری از نتایج منفی کاذب ناشی از میکروارگانیسم‌هایی با اندازه‌های نسبتاً بزرگ سلولی، باید نشان داده شود که ارگانیسم چالش برانگیز از یکغشاء 0.45 میکرومتر، که به عنوان معیار کنترل مثبت عمل می کند.

Brevundimonas diminutaکشت در محیط رشد استاندارد به عنوان ارگانیسم چالش استفاده می شود. تحت شرایط چالش بالا (معمولابزرگتر یا مساوی 107 CFU/cm²از ناحیه فیلتراسیون موثر)، تعداد کمی از باکتری ها قادر به نفوذ به a0.45 μmغشاء

سوسپانسیون باکتریایی از طریق یک فیلتر فیلتر می شودغشاء 0.45 میکرومتربه موازات فیلتر تست کار می کند. فیلتر پایین دست متعاقباً از طریق دیگری فیلتر می شود0.45 μmیاغشاء 0.22 میکرومتر. اگر باکتری های چالش به اندازه کافی کوچک باشند، از غشای اول عبور کرده و توسط غشای پایین دست حفظ می شوند.

2.3 تست زنده ماندن باکتری

هدف از آزمایش زنده ماندن باکتری، ارزیابی قابلیت بقای ارگانیسم چالش برانگیز در سیال فرآیند و تعیین اینکه آیا مایع فرآیند فعالیت باکتریواستاتیکی را نشان می دهد یا خیر.

استریلسالین فیزیولوژیکی 0.9٪معمولاً به عنوان راه حل کنترل استفاده می شود. غلظت تعریف شده ازBrevundimonas diminuta (e.g., >10⁸ CFU/ml) هم به سیال فرآیند و هم به محلول کنترل تلقیح می شود. تغییرات در جمعیت میکروبی در طول مدت فرآیند تعیین شده نظارت می شود.

اگر تعداد میکروارگانیسم های زنده در سیال فرآیند کاهش یابدبیش از 1 ورود نیستدر مقایسه با محلول کنترل، سیال فرآیند در نظر گرفته می شودغیر-باکتریوستاتیکبه سمت ارگانیسم چالش برعکس، کاهش بیش از حد1 لاگنشان می دهد که سیال فرآیند دارای خواص باکتریواستاتیک است.

2.4 استریل کردن دستگاه تست

قبل از آزمایش چالش باکتریایی، کل دستگاه آزمایش باید توسط استریل شوداستریلیزاسیون با حرارت مرطوببرای اطمینان از عقیمی استریلیزاسیون با بخار به طور کلی در انجام می شود121 درجه به مدت 30 دقیقه.

2.5 انتخاب فیلتر

زیرا احتباس میکروبی با نتایج حاصل از آن در ارتباط استتست نقطه حباب غیر مخرب-، یک نقطه حباب بالاتر به طور کلی با بالاتر مطابقت داردمقدار کاهش گزارش (LRV). بنابراین، مطالعات حفظ باکتری ترجیحاً باید با استفاده از کارتریج‌های فیلتر از دسته‌های تولیدی انجام شود که نسبتاً نشان داده می‌شوند.مقادیر نقطه حباب کمتر، نشان دهنده بدترین حالت-مورد است.

مطالعات اعتبار سنجی برای قابلیت نگهداری باکتری به طور کلی شامل می شودسه دسته تولیدی مختلففیلترهای غشایی حداقل یک دسته باید تست سلامت فیزیکی را پشت سر گذاشته باشد در حالی که نتایجی را ارائه می دهد10% حداقل مشخصات قابل قبول سازنده، در نتیجه یک وضعیت حاشیه ای را نشان می دهد.

به همین ترتیب، زیرانتایج تست جریان انتشاریهمچنین با عملکرد نگهداری میکروبی در ارتباط هستند، زمانی که تست جریان انتشاری به عنوان روش تست یکپارچگی انتخاب می شود، کارتریج های فیلتر بامقادیر جریان انتشاری مرزیباید در مطالعه احتباس باکتریایی گنجانده شود. از بین سه فیلتر ارزیابی شده، حداقل یکی باید یک نتیجه جریان انتشاری حاشیه ای را نشان دهد.

2.6 معیارهای پذیرش برای آزمایش حفظ باکتری

معیارهای پذیرش برای آزمایش احتباس باکتری باید حداقل شامل چهار شرط زیر باشد:

1. بدون کلونی ازBrevundimonas diminutaباید بر روی غشای تحلیلی پایین دست فیلتر آزمایش تشخیص داده شود.

2. مستعمرات ازBrevundimonas diminutaباید روی غشای تحلیلی مورد استفاده در آزمایش کنترل مثبت مشاهده شود.

3. کل دستگاه آزمایش باید در طول مطالعه استریل باقی بماند.

4. تعلیق چالش باکتریایی باید سطح چالش مورد نیاز را برآورده کند، حداقل حاوی1 × 107 CFU ازBrevundimonas diminutaبه ازای هر سانتی متر مربع از منطقه فیلتراسیون موثر.

علاوه بر این، فیلتر باید هر دو را با موفقیت عبور دهدقبل از-چالشوآزمون‌های یکپارچگی چالشی- را ارسال کنیدو تمام مقادیر یکپارچگی اندازه گیری شده باید در محدوده پذیرش مشخص شده سازنده باقی بماند.

 

3. تست قابل استخراج و شسته شدن (E&L).

برای اطمینان از اینکه تماس مستقیم بین سیال فرآیند و فیلتر منجر به آزاد شدن مواد از فیلتر به داخل سیال فرآیند نمی شود و یا باعث ایجاد واکنش های شیمیایی بین سطوح تماس که ترکیبات جدیدی تولید می کند، نمی شود.مطالعات قابل استخراج و شستشو (E&L).باید به عنوان بخشی از اعتبار سنجی فرآیند فیلتراسیون استریل کردن انجام شود.

3.1 روش‌های آزمایش برای استخراج‌پذیرها و قابل شستشو

آزمایش مواد قابل استخراج و شسته‌شوی یک ارزیابی ایمنی مهم است که برای ارزیابی ترکیبات شیمیایی که ممکن است از کارتریج‌های فیلتر استریل به محصولات دارویی مهاجرت کنند، استفاده می‌شود.

حلال‌های مدلی که شباهت زیادی به فرمول نهایی دارو دارند، عموماً باید انتخاب شوند. این حلال ها باید دارای ویژگی های فیزیکی و شیمیایی یکسان یا مشابه با ویژگی های محصول نهایی باشند.

آزمایش قابل استخراج معمولاً با استفاده از یکی از موارد زیر انجام می شود:

استخراج استاتیک (خیساندن)

استخراج چرخش دینامیکی

تحت بدترین{0}}شرایط تعریف شده.

3.2 روش های تحلیلی برای استخراج پذیرها و قابل شستشو

مواد قابل استخراج و قابل شستشو که از کارتریج های فیلتر به داخل محیط استخراج آزاد می شوند ممکن است شامل کلاس های مختلفی از ترکیبات باشند، از جمله:

ترکیبات آلی فرار (VOCs)

ترکیبات آلی نیمه فرار (SVOCs)

ترکیبات آلی حساس به حرارت

آنتی اکسیدان ها

مواد-غیر فرار

ترکیبات آلی فرار و نیمه فرار، همراه با ترکیبات حساس به حرارت و آنتی اکسیدان ها، معمولاً با استفاده ازکروماتوگرافی گازی - طیف سنجی جرمی (GC-MS)وکروماتوگرافی مایع با عملکرد معکوس-فاز بالا-(RP-HPLC).

مواد غیر فرار معمولاً با استفاده مشخص می شوندتشدید مغناطیسی هسته ای (NMR)طیف سنجی وطیف‌سنجی فروسرخ تبدیل فوریه (FTIR).

3.3 ارزیابی سم شناسی مواد قابل استخراج و قابل شستشو

بر اساس عواملی مانند غلظت مواد قابل استخراج یا شستشو در محصول نهایی دارویی، دوز تجویز شده، مدت درمان و مسیر مصرف، ارزیابی ایمنی جامع باید مطابق باICH Q3CیاICH M7دستورالعمل هایی برای اطمینان از اینکه مواد استخراج شده از مواد فیلتر یا آزاد شده در طول ساخت، خطرات بالقوه ای برای سلامت انسان ایجاد نمی کند.

در طول این ارزیابی، ترکیب شیمیایی هر قابل استخراج یا شسته شدن باید به طور کامل مشخص شود تا ارزیابی بیشتر در مورد اینکه آیا هر ترکیبی حاوی هشدارهای ساختاری یا سایر ویژگی‌های شیمیایی مورد توجه سم‌شناسی است یا خیر.

 

4. نتیجه گیری

اعتبار سنجی فرآیندهای فیلتراسیون ضدعفونی کننده شامل بیش ازتست سازگاری شیمیایی, آزمایش احتباس باکتریایی، وآزمایش مواد قابل استخراج و قابل شستشو. مطالعات اضافی، از جملهارزیابی عملکرد جذبوتست یکپارچگی با استفاده از محصول واقعی به عنوان مایع مرطوب کننده، همچنین باید در صورت لزوم انجام شود.

این فعالیت‌های اعتبارسنجی باید با توجه به ویژگی‌های سیال فرآیند و شرایط خاص تولید طراحی شوند تا از تأیید جامع کارایی فرآیند فیلتراسیون استریل‌سازی اطمینان حاصل شود.

علاوه بر این، هر زمان که تغییراتی درمحصول, فیلتر، یاپارامترهای فرآینداعتبار فرآیند فیلتراسیون ضدعفونی کننده واجد شرایط قبلی باید دوباره ارزیابی شود. بنابراین، پس از تکمیل اعتبار فرآیند اولیه، ارزیابی های دوره ای ویژگی های محصول و شرایط فرآیند باید انجام شود تا مشخص شود که آیااعتبار سنجی مجددبرای اطمینان از اثربخشی و ایمنی مداوم فرآیند فیلتراسیون ضروری است.

 

مرجع

لیانگ، ایکس.بحث در مورد اعتبار سنجی فرآیندهای فیلتراسیون استریل در تولید داروسازی استریل.
صنعت شیمی گوانگدونگ, 2025, 52(15): 54–55.